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如何解決細(xì)胞培養(yǎng)瓶細(xì)胞成團(tuán)問(wèn)題有哪幾種方式

點(diǎn)擊次數(shù):1547 更新時(shí)間:2022-03-28
  細(xì)胞培養(yǎng)瓶主要用于簡(jiǎn)化大規(guī)模細(xì)胞培養(yǎng)的過(guò)程,培養(yǎng)瓶的設(shè)計(jì)能夠簡(jiǎn)化您的工作流程,減少工作步驟以及降低污染風(fēng)險(xiǎn)。可以使用移液管移去、補(bǔ)充培養(yǎng)基并且收獲細(xì)胞,設(shè)計(jì)有混合區(qū)可實(shí)現(xiàn)在容器內(nèi)的液體混合,因此可以將細(xì)胞懸液、轉(zhuǎn)染或者其他試劑直接加入到培養(yǎng)瓶中進(jìn)行混合。同時(shí),混合區(qū)可確保培養(yǎng)基和細(xì)胞在各層的均勻分布,從而保證細(xì)胞生長(zhǎng)的均勻一致。
 
  細(xì)胞培養(yǎng)瓶中平均分布的培養(yǎng)基、Nunclon表面處理技術(shù)和有效的氣體交換共同為細(xì)胞提供了一個(gè)最佳的培養(yǎng)環(huán)境,從而為細(xì)胞的高產(chǎn)量和細(xì)胞同源性提供保障。在細(xì)胞培養(yǎng)中,細(xì)胞成活率和活性都有顯著提高。培養(yǎng)瓶裝液體積比例提高,單位體積表達(dá)量的增加??梢源罅抗?jié)省培養(yǎng)瓶和培養(yǎng)基的消耗,具有高重復(fù)性,不同批可擴(kuò)展性次細(xì)胞生長(zhǎng)以及產(chǎn)量具有很高的一致性。
 
  首先,細(xì)胞成團(tuán)并不一定都會(huì)影響細(xì)胞培養(yǎng)進(jìn)程。如果細(xì)胞輪廓清晰胞體通透,呈串狀均勻聚集,證明細(xì)胞的生長(zhǎng)狀態(tài)良好。但多數(shù)情況下,聚團(tuán)的細(xì)胞都是輪廓模糊、透光性差,甚至?xí)霈F(xiàn)合胞體,伴有細(xì)胞碎片,這證明細(xì)胞已經(jīng)衰老或產(chǎn)生病變,狀態(tài)不佳。解決細(xì)胞成團(tuán)問(wèn)題可以通過(guò)以下幾種方式:
 
  1、如果細(xì)胞抱團(tuán)不影響生長(zhǎng)就沒(méi)問(wèn)題,只是計(jì)數(shù)時(shí)較麻煩。在消化時(shí),可在細(xì)胞由多角形變成圓型之前,用手輕磕細(xì)胞培養(yǎng)瓶的側(cè)壁,使細(xì)胞從壁上脫落(最好不要吹打,對(duì)細(xì)胞形狀和生長(zhǎng)都不好)。
 
  2、如果感覺(jué)有死細(xì)胞的DNA,在細(xì)胞懸液中加入幾滴無(wú)菌的DNAse(1mg/ml溶于水)將DNA鏈打斷。輕柔地吹打細(xì)胞,防止對(duì)細(xì)胞膜造成物理?yè)p傷。
 
  3、如果細(xì)胞抱團(tuán)是肉眼可見(jiàn)的,可讓細(xì)胞靜置半分鐘左右,然后吸取上半部分沒(méi)有抱團(tuán)的細(xì)胞懸液來(lái)傳代。如果細(xì)胞抱團(tuán)肉眼不可見(jiàn),目前還沒(méi)有特別好的分離方法,只能等細(xì)胞狀態(tài)改善后將這部分細(xì)胞慢慢排除出去。
 
  細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的細(xì)胞出現(xiàn)抱團(tuán)現(xiàn)象,可以按照以上方法進(jìn)行處理,在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中需要及時(shí)觀察細(xì)胞的生長(zhǎng)狀態(tài),并針對(duì)所出現(xiàn)的情況做出相應(yīng)的調(diào)整。
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